叙利亚沙漠中，女吸血鬼丹尼卡（ParkerPosey饰）带领一队同类，深入古老的沙漠宫殿，意欲唤醒沉睡的吸血鬼之王——德雷克（DominicPurcell饰）。夜色中，刀锋（韦斯利•斯奈普斯WesleySnipes饰）仍然与吸血鬼们进行着无休止的战斗，但他很快落入了丹尼卡的圈套，误杀了一名人类，因此被FBI探员威尔逊等人抓捕。与此同时，刀锋的老搭档惠斯勒之女阿比盖尔（JessicaBiel饰）同汉尼拔金（RyanReynolds饰）等年轻人秉持与刀锋相近的信念，组成了一支以自身为诱饵来消灭吸血鬼的队伍，他们将刀锋从FBI和丹尼卡手中救出，但后者对他们的胆大妄为嗤之以鼻，然而面对强大的吸血鬼王德雷克，他们不得不并肩作战……
一小群吸血鬼调查叙利亚沙漠中的一座古墓，他们认为这座古墓属于第一个吸血鬼德古拉，也称为“德雷克”。为了防止刀锋干涉，他们诬陷他谋杀了一名人类魔宠。联邦调查局特工随后找到了布莱德的藏身处并杀死了他的导师兼朋友亚伯拉罕·惠斯勒。布雷德士气低落，投降并被捕。
吸血鬼的使魔已安排当局将刀锋交给他们。他被汉尼拔·金和亚伯拉罕的女儿阿比盖尔·惠斯勒救出，并邀请刀锋加入他们的吸血鬼猎人乐队“夜行者”。从他们那里，刀锋得知金的宿敌丹妮卡·塔洛斯复活了德雷克，目的是利用他的力量治愈吸血鬼的弱点。作为第一个吸血鬼，德雷克能够在阳光下生存。
除了新发明的紫外线“太阳狗”弹药之外，夜行者还创造了一种名为“晨星”的实验性生物武器，能够在基因水平上杀死吸血鬼。然而，他们需要更纯净的血液来源才能使其有效。由于德雷克太强大了，无法通过正常手段杀死他，他们希望病毒能够杀死他，并与他的血液混合，确保其他物种被消灭；但也担心这将包括刀片。
德雷克急于测试刀锋，将他与夜行者隔离开来。他解释了他的观点，即所有人类和吸血鬼在他眼中都是低等的，他打算将他们从地球上抹去。阿比盖尔发现了吸血鬼征服人类计划的证据，这是一个“血液农场”网络，脑死亡的人类的血液被吸干供吸血鬼食用。刀锋关闭了农场的生命维持系统，并处决了那些为吸血鬼围捕无家可归的人类的使魔。
回到夜行者的藏身处，阿比盖尔和刀锋发现除了金和索默菲尔德（晨星的创造者）的女儿佐伊外，其他人都死了，两人都被俘虏了。索默菲尔德留下的录音显示，德雷克的血液是使其完整和有效所需要的全部。金受到吸血鬼的折磨以获取信息，但拒绝说话，即使他们威胁要转变他并强迫他以佐伊的血为食。
刀锋和阿比盖尔赶到并释放了俘虏。德雷克最终在战斗中击败了刀锋，并准备用自己的剑杀死他。阿比盖尔发射了晨星箭，但德雷克在箭击中他之前接住了它。他把它扔到了刀片的地板上，没有意识到它对他造成的危险。阿比盖尔用另一支箭射中了德雷克，这一次使他受伤。刀锋利用干扰，用晨星箭刺伤德雷克，引发化学反应，完成“晨星”病毒，将其释放到空气中。
病毒通过空气传播，杀死了丹妮卡和其他吸血鬼。当德雷克慢慢地屈服于伤口和病毒时，他赞扬刀锋光荣地战斗，但警告他最终会屈服于对血液的需求，从而证明刀锋是吸血鬼种族的未来。德雷克用尽最后的力量，变身为刀锋战士。联邦调查局找到了尸体，但当他们开始尸检时，它变回了已故的德雷克。金讲述了德雷克最终的转变是一份礼物，这样刀锋就能逃脱，让刀锋自由地继续与邪恶势力进行永无休止的战争。